產品資料

非洲豬瘟病毒檢測試劑盒(PCR熒光探針法)

如果您對該產品感興趣的話,可以
產品名稱: 非洲豬瘟病毒檢測試劑盒(PCR熒光探針法)
產品型號: ASFV
產品展商: 普分
產品文檔: 無相關文檔

簡單介紹

非洲豬瘟病毒檢測試劑盒(PCR熒光探針法)免核酸提取,本試劑盒適用于非洲豬瘟病毒檢測,可用于臨床非洲豬瘟病毒感染的輔助診斷,但不作確診使用。非洲豬瘟病毒檢測試劑盒(PCR熒光探針法)本試劑盒針對非洲豬瘟病毒的高度保守區域設計特異性引物和探針,在反應體系中含非洲豬瘟病毒基因組模板的情況下,PCR反應得以進行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應通道信號進行實時監測和輸出,實現檢測結果的定性分析。


非洲豬瘟病毒檢測試劑盒(PCR熒光探針法)  的詳細介紹

非洲豬瘟病毒檢測試劑盒(PCR熒光探針法)免核酸提取,快速檢測。*農業部認可的免核酸提取專門的一家。
【產品名稱】
通用名稱:非洲豬瘟病毒檢測試劑盒(PCR熒光探針法)
英文名稱:African Swine Fever virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包裝規格】 & 50T/盒
【預期用途】
本試劑盒適用于非洲豬瘟病毒檢測,可用于臨床非洲豬瘟病毒感染的輔助診斷,但不作確診使用。
【檢驗原理】    
本試劑盒針對非洲豬瘟病毒的高度保守區域設計特異性引物和探針,在反應體系中含非洲豬瘟病毒基因組模板的情況下,PCR反應得以進行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應通道信號進行實時監測和輸出,實現檢測結果的定性分析。
【主要組成成份】
序號    組成      50T/盒
1    ASFV  PCR反應液      1100 μL/管
2    ASFV 陽性對照         100 μL/管
3    ASFV 陰性對照         100 μL/管

4   樣本稀釋液              12 mL×2管
5    樣本裂解液              1500uL/管
注:陰性對照為豬基因組DNA,陽性為非洲豬瘟經滅活處理的核酸提取物。
【儲存條件及有效期】樣本稀釋液保存2~8度。其余避光-20℃+—5度保存,避免反復凍融,有效期12個月。
【適用儀器】Bio-Rad系列、卡尤迪生物科技MINI8全系列 、等多通道實時熒光定量PCR儀。
【檢驗方法】
1.    試劑準備(試劑準備區)
(1)從冰箱中取出試劑盒, 從試劑盒中取出實驗所需試劑,充分融化混勻5秒,并瞬時離心5秒,以去除管壁附著液體。
2.樣本準備(樣本處理區)
具體操作請來電咨詢本故事。

4. PCR(PCR擴增區)
(1)取樣本處理區準備好的PCR反應管,放置在實時熒光定量PCR儀樣品槽相應位置,并記錄放置順序。
(2)按下表設置儀器核酸擴增相關參數進行PCR擴增。
 
反應體積    25 μL    通道選擇    FAM通道采集非洲豬瘟病毒熒光信號
PCR
反應
條件    步驟    條件    循環數
    UNG處理        95℃:1分鐘(min)    15
    預變性    55℃:1分鐘(min)    1  cycles
    預擴增    95℃:1分鐘(min)    1
      PCR擴增    95℃:5秒(s)    30 cycles
        60℃:  15秒(s)
(此階段結束時采集熒光信號)    

注:ABI系列熒光PCR儀在設置時不選ROX校正,設置淬滅基團選擇None。
【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
 (1)陽性對照:有典型S型擴增曲線或Ct值≤23。
 (2)陰性對照:無S擴增曲線。
2.標本結果判定:
(1)陽性:標本檢測結果Ct值≤23或有明顯指數增長期。
(2)可疑:標本檢測結果Ct值在23~30范圍內。此時應對標本進行重復檢測,如重復實驗結果Ct值仍在30范圍內,有明顯指數增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標本檢測結果Ct值>38或無Ct值。
【檢驗結果的解釋】
通道及檢測結果    標本檢測結果解釋
FAM    
陽性(+)    標本中檢出非洲豬瘟病毒DNA
陰性(-)    標本中未檢出非洲豬瘟病毒DNA
【檢驗方法的局限性】
1.    當檢測樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒的*低檢出限時可能會發生假陰性的結果。
2.    被檢樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中操作方式不當容易造成DNA降解而產生假陰性結果。
3.    樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中發生交叉污染,則容易得到假陽性結果。

【注意事項】
1.    整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線**裝置。
2.    為避免DNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.    每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.    試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.    試劑盒內所配陰性和陽性對照在**次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6.    為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.    儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.    ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.    實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

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